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山西自身免疫疾病检测之免疫球蛋白M检查作用

2017-4-18 14:08:26点击:

山西自身免疫疾病检测之免疫球蛋白M检查作用

免疫球蛋白M检查对免疫性疾病的诊断有辅助意义。

免疫球蛋白M检查过程

免疫比浊法:

①透射比浊法:A.抗血清浓度选择:与参考品进行方阵滴定,最适稀释度的原则为:保持抗体过量,线性范围较宽,与相应Ig反应后产生浊度较高。B.标准曲线:将Ig参考品用稀释液稀释成不同浓度:IgG 5.0、9.0、13.0、17.0、21.0g/L;IgA 1.0、2.0、3.0、4.0、5.0g/L;IgM 0.5、1.2、1.9、2.6、3.3g/L。每个稀释度设3支复管,每管25μl。加入最适稀释度抗血清,每管2.5ml。

37℃水浴1h(IgG)或2h(IgA、IgM)后,用浊度计或比色计在495nm测吸光度。以Ig浓度为横坐标,其吸光度为纵坐标绘制标准曲线。C.标本检测:检测步骤与制备标准曲线相同。测IgG时,待检血清1∶40稀释;测IgA、IgM时1∶5稀释。每批试验同时制标准曲线,并设标本对照(标本加稀释液)和抗血清对照。

②终点散射比浊法:用专用比浊管加入缓冲液0.6ml、1∶36(测IgG、IgA、IgM、C3、C4等)或1∶216(测IgG)稀释样品50μl,再加入抗血清50μl,混匀后37℃水浴30min。用激光免疫比浊仪,按预测项目(如IgG或IgA)键,以空白管(不加抗血清)调零,按测定键,测定各管,即显示所测项目含量。

山西自身免疫疾病检测之免疫球蛋白M检查作用

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